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花青素(Anthocyan)檢測試劑盒說明書

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花青素(Anthocyan)檢測試劑盒(微板法)
產(chǎn)品簡介:
花青素(anthocyan,cyanidin)又稱花色素(anthocyanidin),屬黃烷衍生物,溶解于
細胞液中,是植物體內(nèi)廣泛分布的花色素之一,是花色素苷(anthocyains, anthocyanin) 水
解而得的有顏色的苷元。植物體內(nèi)存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質(zhì)
與花、果實和葉片的顏色有關(guān),而且與果實等樣品衰老過程密切相關(guān),對其加工性能、存儲、
營養(yǎng)價值等都有重要影響。
植物花青素檢測試劑盒(微板法)檢測原理是花青素溶于有機溶劑,以有機溶劑
粗提花青素,花青素在酸性溶液中呈紅色,顏色深淺與花青素含量呈正比,于 530nm 有
大吸收波,可利用酶標儀測定其吸光度,進而計算出花青素的含量,方法簡單易行。因組織
中花青素種類不同,所需標準品亦不同,本產(chǎn)品不含標準品,因此只能檢測花青素的相對含
量。如需檢測樣品中花青素的準確含量,請自備對應(yīng)種類的花青素標準品。本試劑盒主要用
于植物組織或果實中花青素的提取以及定量檢測花青素相對含量。該試盒僅用于科研領(lǐng)域,
不宜用于診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
名稱                                                 100T                               Storage
Anthocyan Assay Buffer              2×500ml                               RT
使用說明書                                        1 份
自備材料:
1、實驗材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織
2、研缽或勻漿器
3、離心管、離心機
4、濾紙或紗布
5、96 孔板
6、酶標儀
操作步驟(僅供參考)
1、花青素提?。?
方法一:
①4℃預(yù)冷研缽或勻漿器,以及 Anthocyan Assay Buffer。
編號
名稱
100T
Storage
Anthocyan Assay Buffer
2×500ml
RT
使用說明書
1 份②取植物組織,洗凈,擦干,稱取新鮮樣品 0.25g,剪碎,置于研缽或勻漿器中。
③加入 2~3ml Anthocyan Assay Buffer,充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入 10ml 離心管,用
Anthocyan Assay Buffer 沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管,補加 Anthocyan Assay
Buffer 至 8ml。
④4℃避光靜置 20min, 期間搖動 2~3 次,然后過濾至離心管,也可用離心機
8000r/min 離心 3min,濾液(上清液)即為花青素粗提液。
方法二:
將樣品按上述比例加入提取液中,置于 32℃溫箱浸提 4~8h(期間可搖動數(shù)次) ,或室
溫下避光浸提 24h,離心取上清即為花青素粗提液。
2、加樣及測定:取 96 孔板,用 Anthocyan Assay Buffer 做空白對照,取花青素提取液
(200~300ul)用酶標儀在 530nm 波長處讀取吸光度值。如果花青素濃度過高,可以
減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定,樣品的檢測好能設(shè)置 2 平行孔,求平均值。
計算:
花青素單位定義:以 OD 值為 0.1 時的花青素濃度稱為一個單位(U)。計算方法如下:
組織樣品的花青素含量(U/g)=(A 測定-A 空白)/(0.1xW)
式中:A 測定=花青素提取液在 530nm 的 OD 值
A 空白=空白對照在 530nm 的 OD 值
W=樣品鮮重(g)
亦可用自備的花青素標準品做梯度稀釋(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml),用
Anthocyan Assay Buffer 做空白對照,繪制標準曲線,進而計算出樣品中花青素的含量。
組織樣品的花青素(mg/g)={C×VT}/(W×V1)
式中:C=根據(jù)標準曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml)
VT=花青素粗提液總體積(ml)=8
V1=加樣時所用花青素粗提液的體積(ml)
W=樣品鮮重(g)
液體樣品的花青素(mg/ml)=C×N/V
式中:C=根據(jù)標準曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml)
V=加樣時所用花青素粗提液的體積(ml)
N=稀釋倍數(shù)
注意事項:
1、 為了避免花青素見光發(fā)生變化,操作時應(yīng)盡量避光,研磨或勻漿應(yīng)盡量縮短時間。
2、 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)花青素含量適當(dāng)調(diào)整。3、 Anthocyan Assay Buffer 應(yīng)密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。
4、 如果沒有酶標儀,也可以使用分光光度計測定。
5、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12 個月有效.
 

 
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