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檢驗(yàn)食品衛(wèi)生

點(diǎn)擊次數(shù):2132     更新時(shí)間:2021-03-05

檢驗(yàn)食品衛(wèi)生

一、

調(diào)味品、醬腌制品中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定

調(diào)味品常因原料的污染及加工制作、運(yùn)輸中不注意衛(wèi)生,而污染上微生物。

1、樣品的采集和處理

1)采樣的要求

食品檢驗(yàn)中,所采集的樣品必須有代表性。因食品的加工批次、原料情況、加工方法、運(yùn)輸、保藏條件、銷售中的各個(gè)環(huán)節(jié)及銷售人員的責(zé)任心和衛(wèi)生認(rèn)識(shí)水平等對(duì)食品衛(wèi)生質(zhì)量有著很大的影響。

樣品種類可分為大樣、中樣、小樣三種。大樣是指一整批;中樣是從樣品各部分取得混合樣品,一般為200g;小樣是指做分樣用的樣品,稱為檢樣,一般以25g為準(zhǔn)。

根據(jù)樣品種類(如袋、瓶和罐裝),應(yīng)取完整、未開(kāi)封的樣品。如果樣品很大,則需用無(wú)菌采樣器采取有代表性的樣品。冷凍食品應(yīng)保持冷凍狀態(tài);非冷凍食品需保持在0~5℃中保存,樣品不得加入任何防腐劑。

采樣必須在無(wú)菌操作下進(jìn)行;采樣用具如探子、鏟子、匙、采樣器、試管、容器等,必須是無(wú)菌的。

采樣后應(yīng)立即貼上標(biāo)簽,標(biāo)記清楚樣品名稱、來(lái)源、數(shù)量、采樣地點(diǎn)、采樣人及采樣時(shí)間。

2)樣品的采集與送檢

①瓶裝醬油或食醋采取原包裝;散裝樣品可用已滅菌吸量管采取。

②醬類:用已滅菌勺子采取,放入無(wú)菌磨口瓶?jī)?nèi)送檢。

原包裝醬油、食醋或醬類采取一瓶;散裝者采取500ml(g)

3)檢樣的處理

醬類用無(wú)菌手續(xù)稱取25g,放入已滅菌容器內(nèi),加入225ml無(wú)菌蒸餾水,吸取醬油25ml,加入滅菌蒸餾水225ml,制成1:10混懸液。

食醋用200~300g/L,滅菌碳酸鈉溶液調(diào)PH值到中性,進(jìn)行檢驗(yàn)。

瓶裝醬油和食醋用點(diǎn)燃的酒精棉球燒灼瓶口滅菌,用石炭酸紗布蓋好,再用已滅菌開(kāi)瓶器啟開(kāi)后進(jìn)行檢驗(yàn)。

2、調(diào)味品、腌醬制品中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定

測(cè)定方法見(jiàn)“糕點(diǎn)、糖果中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定”。

 

二、蛋糕中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定(實(shí)訓(xùn))

1、儀器及試劑

①儀器:冰箱、恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、托盤(pán)天平、可調(diào)式電爐、吸量管、廣口瓶、三角瓶、玻璃珠、平皿、試管、試管架、酒精燈、均質(zhì)器或乳缽、剪刀、滅菌鑷子、75%(體積分?jǐn)?shù))酒精棉球、玻璃蠟筆、登記本、不銹鋼勺、高壓蒸汽滅菌鍋、電熱恒溫干燥箱

②試劑:營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、無(wú)菌生理鹽水、75%(體積分?jǐn)?shù))酒精

2、操作步驟

以無(wú)菌操作將25g蛋糕放入含有225ml滅菌生理鹽水的三角燒瓶?jī)?nèi)或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振蕩或研磨制成(1:10)的均勻稀釋液。用1ml無(wú)菌吸量管,吸?。?:10)稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi),振搖試管使其均勻,制成(1:100)稀釋液。另用1ml滅菌吸量管,按上項(xiàng)操作順序制10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次,即換用1支1ml滅菌吸量管。根據(jù)對(duì)糕點(diǎn)及糖果的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求,選擇2~3個(gè)適宜稀釋度,每稀釋度吸移1ml稀釋液于滅菌平皿內(nèi),一個(gè)稀釋度接種兩個(gè)平皿。立即將預(yù)先冷卻至45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15ml傾入平皿內(nèi),并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。同時(shí),將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿(使平皿底向上),置于(36±1)℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)(48±2)h取出,計(jì)算平板內(nèi)的菌落數(shù),乘以稀釋倍數(shù),即得每克樣品所含菌落總數(shù)。

3、數(shù)據(jù)記錄及處理

做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí),可用肉眼觀察,必要時(shí)用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。

①將各稀釋度平板上的菌落數(shù)填入下表:

平皿1    
平皿2    
平皿3    

②根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果參考“糕點(diǎn)、糖果中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定中《菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告》”報(bào)告檢驗(yàn)結(jié)果:每1g蛋糕中的菌落總數(shù)是

三、

糕點(diǎn)、糖果中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定

1、菌落計(jì)數(shù)方法

作平皿內(nèi)菌落計(jì)數(shù)時(shí),可用肉眼觀察,必要時(shí)用放大鏡檢查,以防遺漏。有條件時(shí)還可用魁北克菌落計(jì)數(shù)器或菌落自動(dòng)計(jì)數(shù)器。在計(jì)下各皿內(nèi)菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各皿內(nèi)的平均菌落數(shù)。到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間,應(yīng)立即計(jì)數(shù)。如果不能立即計(jì)數(shù),應(yīng)將平板在0~4℃下存在,但不要超過(guò)24h。

2、菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序:

檢樣→做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋度→選擇2~3個(gè)適宜的稀釋度,各取1ml加入滅菌平皿內(nèi)→每皿內(nèi)加入適量營(yíng)養(yǎng)瓊脂→(36±1℃,48±2h)菌落計(jì)數(shù)→報(bào)告

3、原理:菌落總數(shù)是指食品經(jīng)過(guò)處理并在一定條件下培養(yǎng)后,所得1ml(g)檢樣中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判別食品被污染程度的標(biāo)志,也可用以觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài),細(xì)菌菌落總數(shù)的測(cè)定一般用國(guó)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的平板計(jì)數(shù)法,所得結(jié)果只包含一群能在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)的嗜中溫需氧菌的菌落總數(shù),并不表示樣品中實(shí)際存在的所有細(xì)菌的菌落總數(shù)。由于菌落總數(shù)并不能區(qū)分細(xì)菌的種類,故常被稱為雜菌數(shù)或需氧菌數(shù)等。

食品種菌落總數(shù)越多,說(shuō)明食品質(zhì)量越差,病原菌污染的可能性越大;當(dāng)菌落總數(shù)僅少量存在時(shí),病原菌污染的可能性就會(huì)降低,或者幾乎不存在。但不能單憑菌落總數(shù)這一項(xiàng)指標(biāo)來(lái)評(píng)定食品衛(wèi)生質(zhì)量的優(yōu)劣,必須配合大腸菌群和病原菌項(xiàng)目的檢驗(yàn),才能對(duì)食品做出比較全面準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。

4、檢樣稀釋及培養(yǎng)

1)以無(wú)菌操作,取樣25g或25ml放入含有225ml滅菌生理鹽水的三角瓶或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振搖或研磨制成(1:10)的均勻稀釋液

2)用1ml無(wú)菌吸量管,吸取(1:10)稀釋液1ml,注入含有9ml生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi),振搖試管,使其混合均勻,制成(1:100)稀釋液。

3)另取1ml無(wú)菌吸量管,按上述操作順序做10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次,即換用1支1ml無(wú)菌吸量管。

4)根據(jù)對(duì)糕點(diǎn)及糖果的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求,選擇2~3個(gè)適宜稀釋度,每稀釋度吸取1ml稀釋液置于滅菌平皿內(nèi),一個(gè)稀釋度接種兩個(gè)平皿。

5)立即將預(yù)先冷卻至45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15ml傾入平皿內(nèi),并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其均勻。同時(shí),將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。

6)瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,置于(36±1)℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)(48±2)h,取出,平板內(nèi)的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即得每克樣品(或每毫升溶液)所含菌落總數(shù)。

5、材料

1)培養(yǎng)基及試劑●無(wú)菌生理鹽水●75%(體積分?jǐn)?shù))乙醇●營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

2)器皿及其它用品●試管(18mm×200mm)●試管架●酒精燈●均質(zhì)器或乳缽●剪刀●滅菌鑷子●75%(體積分?jǐn)?shù))酒精棉球●玻璃蠟筆●登記本●冰箱●恒溫培養(yǎng)箱●恒溫水浴鍋●托盤(pán)天平●可調(diào)式電爐●吸量管●廣口瓶●三角瓶●玻璃珠(直徑為5mm)●平皿(皿底直徑為9mm)●不銹鋼勺等

6、菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告

1)稀釋度的選擇

①應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30~300個(gè)之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。見(jiàn)下表例1。

②若有兩個(gè)稀釋度,其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30~300之間,則應(yīng)視兩者之比如何來(lái)決定。若其比值≤2,應(yīng)報(bào)告平均數(shù);若>2,則報(bào)告其中較小的數(shù)字。見(jiàn)下表例2、例3。

③若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均>300,則應(yīng)按稀釋倍數(shù)zui高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。見(jiàn)下表例4。

④若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均<30,則應(yīng)按稀釋倍數(shù)zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。見(jiàn)下表例5。

⑤若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300個(gè)之間,其中一部分>300或<30時(shí),則以zui接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。見(jiàn)下表例6。

⑥若所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以<1乘以zui低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。見(jiàn)下表例7。

2)平皿菌落數(shù)的選擇選取菌落數(shù)在30~300個(gè)之間的平皿作為菌落總數(shù)的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度應(yīng)采用兩個(gè)平皿內(nèi)的菌落平均數(shù),其中一個(gè)平皿有片狀菌落生長(zhǎng)時(shí),則不宜采用,而應(yīng)采用無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平皿作為該稀釋度的菌落數(shù)。若片狀菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落分布有很均勻,則可計(jì)算半個(gè)平皿后乘2,以代表全皿菌落數(shù)。

3)菌落數(shù)的報(bào)告

菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí),按其實(shí)有數(shù)報(bào)告;>100時(shí),采用兩位有效數(shù)字,在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值,以四舍五入方法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù),也可用10的指數(shù)來(lái)表示。見(jiàn)下表:

稀釋度選擇及菌落數(shù)報(bào)告方式

例次

稀釋度及菌落數(shù)

兩稀釋液之比

菌落總數(shù)/(個(gè)/g或個(gè)/ml)

報(bào)告方式/(個(gè)/g或個(gè)/ml)

10-1

10-2

10-3

1

1365

164

20

——

16400

16000或1.6×104

2

2760

295

46

1.6

37750

38000或3.8×104

3

2890

271

60

2.2

27100

27000或2.7×104

4

多不可計(jì)

4560

513

——

513000

510000或5.1×105

5

27

11

5

——

270

270或2.7×102

6

多不可計(jì)

305

12

——

30500

31000或3.1×104

7

0

0

0

——

<1×10

<10

7、結(jié)果

①將試樣測(cè)出的樣品數(shù)據(jù)以報(bào)表方式報(bào)告結(jié)果。

②對(duì)樣品細(xì)菌總數(shù)做出是否符合食品衛(wèi)生要求的結(jié)論。

8、注意事項(xiàng)

檢樣的稀釋液可用滅菌鹽水或蒸餾水。如果對(duì)含鹽量較高的食品(如醬品)進(jìn)行稀釋,則宜采用蒸餾水。培養(yǎng)溫度應(yīng)根據(jù)食品種類而定。加入平皿內(nèi)的檢樣稀釋液(特別是101的稀釋液)有時(shí)帶有檢樣顆粒,為了避免與細(xì)菌菌落發(fā)生混淆,可做一檢樣稀釋液與瓊脂混合的平皿,不經(jīng)培養(yǎng),于4℃環(huán)境中放置,以便于在計(jì)數(shù)檢樣菌落時(shí)用作對(duì)照。為了控制和了解污染,在取樣進(jìn)行檢驗(yàn)的同時(shí),于工作臺(tái)上打開(kāi)一塊瓊脂平板,其暴露的時(shí)間應(yīng)與該檢樣從制備、稀釋到加入平皿時(shí)所暴露的時(shí)間相當(dāng),然后與加有檢樣的平皿一起培養(yǎng),以了解檢樣在檢驗(yàn)操作過(guò)程中有無(wú)受到來(lái)自空勤的污染。檢樣若是微生物類制劑(如酸乳、乳酒),則平板計(jì)數(shù)中應(yīng)相應(yīng)地將有關(guān)微生物排除,不可并入檢樣的菌落總數(shù)中作報(bào)告。注意每遞增稀釋一次,必須另?yè)Q一支1ml滅菌吸量管,使所得檢樣的稀釋倍數(shù)準(zhǔn)確。為防止細(xì)菌增殖產(chǎn)生片狀菌落,在檢液加入平皿后,應(yīng)在20min內(nèi)傾入瓊脂,并立即使之與瓊脂混合均勻。平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)法,只能檢出生長(zhǎng)的活菌,不能檢出樣品中全部的細(xì)菌數(shù),計(jì)數(shù)總是比食品中實(shí)際存在的細(xì)菌數(shù)要少。但仍能借此評(píng)定整個(gè)食品被細(xì)菌污染的程度,一般食品的衛(wèi)生檢驗(yàn)中都普遍采用這種方法。檢驗(yàn)中所需玻璃儀器必須是*滅菌的,并在滅菌前*清洗干凈,不得殘留有抑制物。用作樣品稀釋的液體,每批都要有空白對(duì)照。

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