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知道接種操作前的步驟么

點(diǎn)擊次數(shù):3938     更新時(shí)間:2021-01-22

知道接種操作前的步驟么

 一、火焰灼燒涂布棒

涂布棒在進(jìn)行平板涂布操作之前,需要經(jīng)過火焰灼燒滅菌。具體操作見下圖。


1.將涂布棒彎頭的一端浸入酒精,注意不可浸入的太深,手持部分不可浸入或沾上酒精。  


2.將涂布棒取出,至酒精不再下滴的時(shí)候置于酒精燈的外焰進(jìn)行灼燒。注意蘸后不要過度傾斜涂布棒防止酒精沿涂布棒的柄倒流引燃到手。




二、接種環(huán)的灼燒

1.如果接種環(huán)上沾有液體或細(xì)菌,先將接種環(huán)的頭靠近火焰外焰但不要深入,要先將環(huán)上液體烤干,這樣做是為了防止液滴瞬間溫度升高飛濺污染周圍環(huán)境。


2.一般用右手豎直持接種柄(這里提到的接種柄是金屬材質(zhì),外面套有一段硬質(zhì)耐熱型塑料或膠皮的手持部分),將接種環(huán)前段的圓環(huán)在火焰外焰中燒紅。


3.將接種柄略微傾斜,向左下方刺去,將接種環(huán)前段的金屬絲從頭至基部緩慢通過外焰至*燒紅。燒紅時(shí)需要注意接種環(huán)金屬絲不要碰到桌面,切不要灼燒手握的位置。


4.繼續(xù)向左下方移動(dòng),慢慢調(diào)整角度,將接種柄在外焰上進(jìn)行灼燒。接種環(huán)沿原路返回,來回往復(fù)灼燒幾次。    


5.將金屬絲與接種柄的連接處,用酒精外焰灼燒滅菌。這個(gè)連接處由于螺絲紋路較多,表面并非平整光滑, 容易留存微生物,并且在接種操作中,這個(gè)部位一般都進(jìn)入試管或平皿內(nèi),所以這個(gè)位置的灼燒非常重要。


6.連接處灼燒完以后,zui后再將金屬絲和接種環(huán)燒紅一次,退出火焰。



三、持平皿手勢(shì)

平皿的拿法分兩種:手指托法和手掌托法。


手指托法將平皿置于左手中指、無名指和小指上,然后左手食指和拇指分別扣住平皿的邊緣,用左手拇指開啟平皿蓋。手指托法適用于操作人員手比的情況。由于靠食指和拇指控制平皿蓋。因此開合平皿十分靈活。


手掌托法將平皿置于左手手掌上,左手食指、中指、無名指和小指的第-一關(guān)節(jié)扣住平皿底的邊緣。然后用左手拇指將平皿蓋向上頂開。這種持平皿的方法適用于操作人員手比較小的情況。但是由于只靠拇指來開合平皿,因此平皿開口無法開的很大。


以上兩種持平皿的姿勢(shì)只是針對(duì)直徑9cm以下的平皿而言,對(duì)于更大直徑的平皿,例如直徑14cm的平皿。無法用一只手完成持平皿并開合的動(dòng)作,需要將平皿放在與酒精燈火焰等高的平臺(tái)上。然后用左手開合平皿。



四、移液管的使用

使用移液管時(shí),嚴(yán)格禁止用口吸取液體??谖后w會(huì)將待移取液體中的病原體吸到口中,十分危險(xiǎn)。許多與實(shí)驗(yàn)室有關(guān)的感染都是經(jīng)口吸入和食入危險(xiǎn)性物質(zhì)所造成的??谖后w還會(huì)污染操作對(duì)象。盡管移液管末端塞有棉花,但是棉花塞并不能有效的過濾微生物。感染性顆粒仍有可能通過它被吸入,當(dāng)棉花塞塞的很緊時(shí),吸取的時(shí)候可能要更用力,反而會(huì)導(dǎo)致棉花塞、氣溶膠甚至液體被吸出。所以一定要用吸耳球或機(jī)械吸氣裝置進(jìn)行吸取液體和液體轉(zhuǎn)接的操作。以吸耳球?yàn)槔唧w介紹移液管的移液操作,具體操作如圖。

1.點(diǎn)燃酒精燈。將盛有待移取液體的容器置于酒精燈火焰周圍10cm的距離以內(nèi),打開容器。左手持已滅菌的移液管接近頂部的位置,左手拇指、中指和左左手無名指拿住一根已滅菌的移液管,左手食指自然打開,左手食指要處于其指肚能觸及移液管頂端的距離范圍內(nèi)。將移液管迅速插入容器液面以下,但不要觸及容器底部,右手持捏扁的吸耳球抵在移液管頂部開始吸取液體,控制吸耳球膨脹的速度,防止速度過快引起液體噴出。吸取液體的體積要大于所需的體積。拿開吸耳球,左手食指指肚迅速蓋在移液頂端,用力程度以管內(nèi)液體不流動(dòng)即可。


2.將移液管豎直拿好,微微調(diào)節(jié)左手食指,使移液管內(nèi)液面緩緩下降至所需的液體體積。注意以液面的凹面zui低處為準(zhǔn)。


3.右手取來盛液體的容器(如試管)。將移液管前端貼目標(biāo)容器壁。松開左手食指移液管內(nèi)液體自然流入容器內(nèi)。



五、移液器的使用

由于移液管使用不便且容易造成污染。因此在有條件的實(shí)驗(yàn)室通常使用移液器來移取液體。


移液器規(guī)范使用的重要性無論怎么強(qiáng)調(diào)都不過分。移液器的使用需要注意:移液器在用完之后,一定要調(diào)回至zui大量程處,避免移液器內(nèi)各組件長時(shí)間處于彈力壓縮狀態(tài),影響移液器的精-準(zhǔn)程度,造成移液器使用壽命縮短甚至損壞;不管設(shè)定的液體體積是多少,通常移液器的按鈕有兩檔,吸液時(shí)按到第-一檔,排液時(shí)按到底(第二檔);在酒精燈火焰附近操作時(shí)避免火焰灼燒到移液器槍桿。移取液體后需保持槍頭向下。不得傾斜槍體導(dǎo)致液體倒流;移液器槍體內(nèi)部存在污染(除非是已滅菌的可滅菌移液器),用于接種時(shí)需引起注意。



六、持接種環(huán)的手勢(shì)



以拿筆或毛筆的手勢(shì)持接種環(huán)環(huán)柄,以手指固定住接種環(huán)柄,一手指和手腕的轉(zhuǎn)動(dòng)來控制接種環(huán)的運(yùn)動(dòng)。

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