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霉菌和酵母計(jì)數(shù) 霉菌培養(yǎng)容易污染

點(diǎn)擊次數(shù):2052     更新時(shí)間:2020-11-22

霉菌和酵母計(jì)數(shù) 霉菌培養(yǎng)容易污染

GB 4789.15-2016  霉菌和酵母計(jì)數(shù) 已經(jīng)實(shí)施一段時(shí)間了,很多小伙伴們?cè)谡搲蟹磻?yīng)新版國(guó)標(biāo)匯總霉菌正置培養(yǎng)容易污染,今天小編就來(lái)為大家分析一下這個(gè)問(wèn)題。

大家如果還是想驗(yàn)證一下究竟是什么原因造成的污染,這里提供一個(gè)簡(jiǎn)單的驗(yàn)證試驗(yàn):在正常檢測(cè)的環(huán)境中倒一組空白平皿,將這些平皿分為AB兩組,其中A組用封口膜將平皿封好,B組不封,均放置在培養(yǎng)箱中正置培養(yǎng)。若是A組B組均有霉菌生長(zhǎng),則需要考慮培養(yǎng)基污染或者操作環(huán)境的污染;若是A組不生長(zhǎng)霉菌而B(niǎo)組生長(zhǎng),則需要考慮是培養(yǎng)箱內(nèi)的環(huán)境污染。通過(guò)這個(gè)小試驗(yàn),可以基本上確定污染源,然后針對(duì)污染源進(jìn)行相應(yīng)的處理。 

GB 4789.15-2016相比GB 4789.15-2010,zui大的區(qū)別可能就在于對(duì)平皿的培養(yǎng)方式。2016版的國(guó)標(biāo)在5.2中要求:瓊脂凝固后,正置平板,置28℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),觀察并記錄培養(yǎng)至第5d的結(jié)果。其實(shí)針對(duì)這一條,需要注意兩點(diǎn):第-一,是需要對(duì)平板進(jìn)行觀察的,不能直接培養(yǎng)至第5天計(jì)數(shù),因?yàn)槊咕奶厥庑裕谂囵B(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量孢子,導(dǎo)致整個(gè)平板蔓延。因此,在培養(yǎng)后的第2天開(kāi)始,就要對(duì)平板進(jìn)行觀察,并計(jì)數(shù)典型菌落,而這樣的觀察在之后每一天都應(yīng)該進(jìn)行,直至培養(yǎng)第5天。第二,就是正置培養(yǎng)。這一點(diǎn)是16版國(guó)標(biāo)與舊版zui大的區(qū)別,10版之前的國(guó)標(biāo)都是倒置培養(yǎng)的。而進(jìn)行正置培養(yǎng),很多朋友可能都會(huì)遇到平板被霉菌污染的問(wèn)題,比如圖中的情況,這怎么解決呢?

GB 4789.15-2016 霉菌和酵母計(jì)數(shù) 霉菌培養(yǎng)容易污染,實(shí)驗(yàn)室該如何解決?

其實(shí)造成這種情況的原因有很多種,可能有培養(yǎng)箱環(huán)境污染,平皿冷凝水污染,操作環(huán)境污染、培養(yǎng)基問(wèn)題等等,這些問(wèn)題都該如何解決呢?

正置培養(yǎng)和倒置培養(yǎng)有什么區(qū)別?很多實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)霉菌采用的是的霉菌培養(yǎng)箱,所以培養(yǎng)箱空間里會(huì)有大量的霉菌孢子。而平皿的蓋和底是有一定縫隙的,尤其是玻璃平皿縫隙還是比的,正置培養(yǎng)中,孢子會(huì)向上飛揚(yáng)通過(guò)縫隙落到平板的培養(yǎng)基上,導(dǎo)致污染。細(xì)心地實(shí)驗(yàn)猿可能發(fā)現(xiàn),污染的菌落大部分都是在平皿邊緣生長(zhǎng)的。用一次性塑料平皿來(lái)培養(yǎng),污染的概率就會(huì)小很多,因?yàn)橐淮涡运芰掀矫蟮纳w和底之間的縫隙相比之下是比較小的。因此培養(yǎng)箱環(huán)境中的孢子可能會(huì)是主要污染源。這樣一來(lái),就應(yīng)該對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行殺菌??梢钥紤]用紫外線殺一下,同時(shí)輔助消毒劑擦拭的方法,常用消毒劑比如75%酒精和新潔爾滅等,應(yīng)該注意的是,這樣的殺菌操作也是需要經(jīng)常進(jìn)行的,因?yàn)槊咕逆咦邮鞘蛛y清楚的,而每次培養(yǎng)可能又會(huì)引進(jìn)新的污染源,可以考慮每周進(jìn)行兩次,保證培養(yǎng)環(huán)境無(wú)污染源。

還有別的方面需要注意,首先就是平皿上的泠凝水問(wèn)題。正置培養(yǎng)過(guò)程中,若是平皿的上蓋有泠凝水,在培養(yǎng)過(guò)程中冷凝水滴落到培養(yǎng)基上,也極容易造成菌落蔓延,平皿污染。因此在培養(yǎng)之前,一定要保證平皿干燥,可以把平皿放在37℃的環(huán)境里烘干,烘干之后再進(jìn)行培養(yǎng),就會(huì)避免這個(gè)原因造成的污染。

zui后還有就是操作環(huán)境和培養(yǎng)基的污染。因?yàn)闊o(wú)菌室里可能也會(huì)因?yàn)闇缇Ч焕硐朐斐晌廴?。小編之前工作的?shí)驗(yàn)室,操作臺(tái)使用紫外線滅菌,經(jīng)常就會(huì)滅菌不*有孢子污染,尤其是在進(jìn)行過(guò)霉菌的相關(guān)檢測(cè)之后。所以在進(jìn)行過(guò)霉菌檢測(cè)之后,適當(dāng)?shù)脑鲩L(zhǎng)滅菌時(shí)間,可能會(huì)達(dá)到比較理想的效果。另外小編之前工作的實(shí)驗(yàn)室,為了*解決無(wú)菌室空間孢子污染的問(wèn)題,還特地購(gòu)買安裝了臭氧發(fā)生器,通過(guò)紫外線+臭氧的雙重消毒模式,效果就十分理想了。

 

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