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毛細(xì)管色譜柱的注意事項(xiàng)

點(diǎn)擊次數(shù):1302     更新時(shí)間:2020-11-04

毛細(xì)管色譜柱的注意事項(xiàng)

在空白試驗(yàn)的色譜圖中,不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn),如果出現(xiàn)了色譜峰,通??赡苁菑倪M(jìn)樣口帶來的污染物。如果在正常的使用狀態(tài)下,色譜柱的性能開始下降,基線的信號(hào)值會(huì)增高。另外,如果在較低的溫度下,基線信號(hào)值明顯大于初始值,那么有可能是色譜柱和系統(tǒng)有污染。

 

毛細(xì)管色譜柱只有正確的安裝,才能保證發(fā)揮其zui-佳的性能和延長(zhǎng)使用壽命。正確安裝請(qǐng)參考以下步驟。

    步驟1:檢查氣體過濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等。 檢查氣體過濾器和進(jìn)樣墊,保證輔助氣和檢測(cè)器的通氣暢通,如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物,需要將進(jìn)樣口的襯管清洗或更換。

    步驟2:將螺母和密封墊裝在色譜柱上,并將色譜柱兩端小心切平,切面要平滑整齊。

    步驟3:將色譜柱連接于進(jìn)樣口上。 色譜柱在進(jìn)樣口中插入的深度應(yīng)根據(jù)所使用的GC儀器不同而定,正確合適的插入能zui-大可能地保證試驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。通常,色譜柱的入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部,即處于進(jìn)樣針穿過隔墊*插入進(jìn)樣口后針尖與色譜柱入口相距1~2cm,(具體的插入程度和方法參考所使用GC的隨機(jī)手冊(cè))。

    避免用力彎曲擠壓毛細(xì)管柱,并小心不要讓標(biāo)記牌等帶有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)管柱接觸摩擦,以防毛細(xì)管柱斷裂受損。

    色譜柱正確插入進(jìn)樣口后,將連接螺母擰上,擰緊后(用手?jǐn)Q不動(dòng)了)用扳手再多擰1/4—1/2圈,保證安裝的密封程度。不緊密的安裝,不僅會(huì)引起裝置的泄漏,而且有可能對(duì)色譜柱造成永-久損壞。

    步驟4:接通載氣。 當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后,通入載氣,調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。

    將色譜柱的出口端插入裝有已烷的樣口瓶中,正常情況下可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡就要重新檢查載氣裝置和流量控制器等是否設(shè)置正確,并檢查整個(gè)氣路有無泄漏,待所有問題解決后,將色譜柱出口從瓶中取出,保證柱端口無溶劑殘留,再進(jìn)行下一步的安裝。

    步驟5:將色譜柱連接于檢測(cè)器上。 色譜柱與檢測(cè)器的連接安裝和所需注意的事項(xiàng)和色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同。如果在應(yīng)用中系統(tǒng)所使用的ECD或NPD等,那么在老化色譜柱時(shí),應(yīng)該將色譜柱與檢測(cè)器斷開,這樣檢測(cè)器可避免被污染。

    步驟6:確定載氣流量,再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查。 注意:如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱,會(huì)快速且永-久性的損壞色譜柱。

    步驟7:色譜柱的老化。 色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化,對(duì)色譜柱加熱至一恒定溫度,通常取其溫度上限。特殊情況下,可加熱至高于zui高使用溫度10~20℃左右,但是一定不能超過色譜柱的溫度上限否則極易損壞色譜柱。當(dāng)達(dá)到老化溫度后,記錄并觀察基線,初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,在達(dá)到老化溫度后5~10min開始下降,并且會(huì)持續(xù)分鐘,當(dāng)達(dá)到一個(gè)固定的值后就會(huì)穩(wěn)定下來。如果在小時(shí)后基線仍無法穩(wěn)定,或者在15~20分鐘后仍無明顯的下降趨勢(shì),那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。遇到這樣的情況,應(yīng)立即將柱溫降到40℃以下,盡快地檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問題,如果還是繼續(xù)老化,不僅對(duì)色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。

    一般來說,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間較長(zhǎng),而弱極性固定和較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化方法有各不相同,須按色譜柱供應(yīng)商提供的老化條件進(jìn)行老化。

    PLOT柱的老化步驟:

    AT·Pora系列 250℃ 8h以上

    Molecular Sieve(分子篩) 350℃ 12h

    Alumina(氧化鋁) 200℃ 8h以上

    由于水在氧化鋁和分子篩PLOT柱中的不可逆吸附,使得這兩種色譜柱容易發(fā)生保留行為漂移,當(dāng)柱子分離過含有高水份樣品后,需要將色譜柱重新老化,以除去固定相中吸附的水分。

    步驟8:設(shè)置確認(rèn)載氣流速。 對(duì)于毛細(xì)管色譜柱使用載氣首-選高純度氮?dú)饣驓錃?,載氣的純度zui-好大于99.95%,而其中的含氧量越小越好。

    如果您使用的是毛細(xì)管色譜柱,那么依照載氣的平均線速度(cm/s),而不是利用載氣流量(ml/min)來對(duì)載氣做出評(píng)價(jià),因?yàn)橹У挠?jì)算采用的是載氣平均線速度。平均線速度值:氮?dú)猓?0~20cm/s 氫氣:20~25cm/s
在載氣的管線中加入氣體過濾裝置不僅可以延長(zhǎng)色譜柱壽命,而且很大程度地降低了背景噪音,建議zui-好安裝一個(gè)高容量脫氧管和一個(gè)載氣凈化器。使用ECD系統(tǒng)時(shí),zui-好能在其輔助氣路中也安裝一個(gè)脫氧管。

    步驟9:柱流失檢測(cè)。 在色譜柱老化過程結(jié)束后,采用程序升溫作一次空白試驗(yàn)(不進(jìn)樣),一般是以10℃/min從50℃升到zui高使用溫度,達(dá)到zui高使用溫度后保持10min,這樣我們就會(huì)得到一張流失圖。這些數(shù)值可以后作對(duì)比試驗(yàn),并且對(duì)實(shí)驗(yàn)問題的解決有幫助。

    

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