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前列腺特異抗原(PSA)放免檢測(cè),PSA放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)

點(diǎn)擊次數(shù):1714     更新時(shí)間:2020-01-03

前列腺特異抗原(PSA)放免檢測(cè),PSA放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)

信帆生物供應(yīng)前列腺特異抗原(PSA)放免檢測(cè)服務(wù),提供PSA放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。

前列腺特異抗原(prostate  specific  antigenPSA)是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的糖蛋白,有*的組織特異性,分子量為33000,含糖量為7%,由240個(gè)氨基酸組成,屬于糖基化的單鏈肽。PSA僅存在于前列腺上皮細(xì)胞的胞質(zhì)、導(dǎo)管上皮和粘液內(nèi),具有糜蛋白酶樣和胰蛋白酶的活性,在前列腺癌診斷中是一種重要的腫瘤標(biāo)志物,比前列腺酸性磷酸酶(PAP)有更大的特異性和靈敏度。

本試劑盒用于定量測(cè)定人血清中前列腺特異抗原(PSA的含量。PSA在前列腺癌的診斷、病情觀察和有無(wú)轉(zhuǎn)移灶的判斷上是一種重要的觀察指標(biāo) ,此項(xiàng)指標(biāo)已被廣泛用于男性體檢,以達(dá)到對(duì)前列腺癌的早期診斷、早期治療的目的。

本試劑盒采用雙抗體夾心法。使用2株抗PSA單克隆抗體,用其中一株單抗包被聚苯乙烯試管,在包被管中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或血清樣品后,再加入125I標(biāo)記的另一株P(guān)SA單克隆抗體,溫育后即形成固相抗體-抗原-125I標(biāo)記抗體復(fù)合物。洗滌后測(cè)定每管CPM值,其強(qiáng)度與PSA濃度成正比。以各標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對(duì)數(shù)和各標(biāo)準(zhǔn)品CPM值的對(duì)數(shù)作線性擬和,得出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品CPM值代入方程式就可計(jì)算出樣品中PSA濃度。

 

【樣本要求】

病人標(biāo)本無(wú)須特殊處理,采取正確醫(yī)用技術(shù)取靜脈血,分離血清待測(cè)。如五天內(nèi)檢測(cè),血清可存放于2-8℃冰箱,否則需將血清樣本密封后,置-20℃以下凍存,保存期不超過三個(gè)月,避免反復(fù)凍融。采血前兩周內(nèi)嚴(yán)禁前列腺及前列腺指檢、前列腺穿刺、尿道器械穿刺等檢查,以免導(dǎo)致血清PSA升高。

【試驗(yàn)方法】

  • 準(zhǔn)備:取出試劑盒和血清樣品,室溫平衡15—30分鐘。
  • 往PSA包被管中加入100μl標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控或樣品,建議標(biāo)準(zhǔn)品加雙孔。每孔分別加入125I 標(biāo)記物200μl。充分混勻。
  • 置37℃溫育2小時(shí)。
  • 溫育完畢抽凈反應(yīng)液并用蒸餾水洗滌,如此重復(fù)4-5次,后一次盡量將管內(nèi)殘留液體抽干。
  • 操作步驟

PSA包被管若干,用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)T、S0~S5和待測(cè)樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑包括血樣品好平衡到室溫。

數(shù)據(jù)處理

聯(lián)機(jī)處理

由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。建議用戶使用log-log數(shù)據(jù)處理模式。

計(jì)算器處理使用有線性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書。

【對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1.試驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制:

0.5ng/mL~64ng/mL濃度范圍內(nèi)用log-log方程擬合,劑量-反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)不低于0.9900;

質(zhì)控血清測(cè)定值應(yīng)在允許范圍內(nèi)。

如果標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)低于0.9900或者質(zhì)控血清測(cè)定值不在允許范圍內(nèi),則本次試驗(yàn)視為無(wú)效,應(yīng)重新進(jìn)行檢測(cè)。

2.正常參考值:<4ng/ml

由于地區(qū)不同,使用的儀器不同,所測(cè)正常值存在一定差異,因此本說(shuō)明書所提供的正常值僅作參考,各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)病人群

體建立自己的正常值范圍。另外,正常人PSA的含量隨著年齡的增加有所提高,應(yīng)注意受檢者年齡情況。

3.據(jù)報(bào)道血清PSA定量的陽(yáng)性臨界值為大于10ng/m時(shí),前列腺癌的診斷特異性達(dá)90%-97%。近的實(shí)驗(yàn)表明,在前列腺癌中游離PSA/總PSA比正常情況下要低。一般認(rèn)為F/T(f-PSA/t-PSA)臨界值為0.20,在0.20以下均需考慮前列腺癌的問題。PSA在4-10ng/ml時(shí),F(xiàn)/T比值可在良性和惡性前列腺疾病中發(fā)生顯著的變化,測(cè)定f-PSA并結(jié)合其他檢查能夠提高前列腺癌檢測(cè)的特異性,而不降低其靈敏度。良性前列腺增生、前列腺炎、腎臟和泌尿生殖系統(tǒng)疾病,血清PSA水平也可升高,也應(yīng)進(jìn)行其他必要的檢查加以甄別。約有5%的前列腺癌患者,前列腺酸性磷酸酶(PAP)升高,但PSA在正常水平。此外研究者認(rèn)為PSA檢查值為2.0~4.0 ng/ml的人是患前列腺癌的高危人群,應(yīng)每年檢查一次。

4.CA19-9、CA125、CEA、高血脂、高膽紅素、高血紅蛋白對(duì)本藥盒樣品測(cè)定的影響:試驗(yàn)證明,CA19-9、CA125、CEA、高血脂、高膽紅素、高血紅蛋白等對(duì)測(cè)定沒有明顯的影響。

【該試驗(yàn)方法的局限性】

本試劑盒測(cè)定范圍為0.3~100ng/mL。超出試劑盒測(cè)定范圍的測(cè)定結(jié)果是通過標(biāo)準(zhǔn)品曲線外延得出的計(jì)算結(jié)果,不作為準(zhǔn)確定量數(shù)據(jù)。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1.測(cè)定范圍:0.3-100ng/ml

2.靈敏度:0.1ng/ml

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù):0.9900

4.分析內(nèi)變異系數(shù):CV10.00%;分析間變異系數(shù):CV15.00%

5.質(zhì)控血清的測(cè)定值:在給定范圍內(nèi)。

【注意事項(xiàng)】

  • 本藥盒及其成分應(yīng)于2-8保存,使用前應(yīng)平衡至室溫,加試劑前必須搖勻。
  • 操作前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,不同批號(hào)的試劑不得混用。
  • 包被管需密封防潮,包被管打開后,剩余包被管應(yīng)裝入

袋中密封保存,以免受潮。

  • 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致,盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。
  • 加樣頭不可混用,以免交叉污染。
  • 加標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控或樣品時(shí)注意將樣本加到試管底部;加標(biāo)記物時(shí)加樣頭不要碰到液面。
  • 溫育之前應(yīng)充分混合均勻。
  • 洗滌要*。每次洗滌應(yīng)抽凈管內(nèi)液體,應(yīng)盡量將管內(nèi)液體抽干。
  • 試劑請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。
  • 標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性,請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。

前列腺特異抗原(PSA)放免檢測(cè),PSA放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)

 

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